一、赛多培®大肠杆菌高密度表达培养基
赛多培®大肠杆菌高密度表达培养基是尊龙凯时研发的一种适合于大肠杆菌生长和蛋白表达的即用型全成分培养基。使用该培养基,只需一步操作,无需添加IPTG诱导剂,即可收获含表达蛋白的菌体,与常规方法相比,对绝大多数蛋白表达,其菌体生物量和对应的目的蛋白都明显提高数倍以上。
☆ 产品优势
1. 操作简单,提高效率
直接挑取单菌落或用甘油菌接种,一步操作,然后培养过夜或培养至平台期收菌,中间不用监测生长状态(监测OD值),不用添加诱导剂。节省人力和仪器设备。
2. 全成分,即用型
全成分配方,支持大肠杆菌长时间生长和蛋白持续表达,不含潜在有毒有害物质(如IPTG)。
3. 菌体收获量大,蛋白产率高
与常规诱导表达(LB培养基或2YT培养基,IPTG诱导)相比,对于绝大多数蛋白表达系统,无论是培养相同的时间还是都培养至菌体生长平台期,用赛多培®大肠杆菌高密度表达培养基所收获的菌体生物量以及对应的目的蛋白产量都明显增高,最高可达数倍以上。
4. 适用范围广
1)可适用于大肠杆菌各种以IPTG为诱导剂的载体,包括lac启动子载体,tac启动子载体以及T7启动子载体等,如pGEX系列载体(GST融合载体),pET系列载体等常用载体;
2)既适用于低温表达(如18°C,22°C或25°C),也适用30°C和37°C表达;
3)既适用于可溶表达,也适用于包涵体表达。
☆ 蛋白表达情况对比
赛多培®大肠杆菌高密度表达培养基与普通LB培养基(IPTG常规诱导)培养过夜后蛋白表达对比:
培养条件:30°C,200rpm;
LB培养基诱导条件:OD600=1.0加IPTG终浓度为1mM,继续培养过夜(约20小时)。
注: 1: LB培养基IPTG诱导 2: 赛多培®大肠杆菌高密度表达培养基
赛多培®大肠杆菌高密度表达培养基与普通LB培养基(IPTG常规诱导)培养终了时蛋白表达对比:
培养条件:30°C,200rpm;
LB培养基诱导条件:OD600=1.0加IPTG终浓度为1mM,继续培养至平台期(约22-24小时);
赛多培®大肠杆菌高密度表达培养基培养至平台期约40-48小时。
注: 1: LB培养基IPTG诱导 2: 赛多培®大肠杆菌高密度表达培养基
产品目录
货号 |
产品名称 |
规格 |
目录价格 |
PR0101 |
赛多培®大肠杆菌高密度表达培养基 |
500 mL |
465 |
PR010-5L |
5L |
4100 |
|
PR010-10L |
10L |
6970 |
二、赛多培®增强型LB预混培养基
传统LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl,其中酵母提取物为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供无机盐。赛多培®增强型LB预混培养基是尊龙凯时在传统LB培养基的基础上改良而来,能够较传统LB培养基大大提高菌体密度,提高目的蛋白表达量数倍。
使用赛多培®增强型LB预混培养基进行大肠杆菌培养时,流程与传统LB培养基使用方法一致,与“赛多培®大肠杆菌高密度表达培养基”有所区别的是,赛多培®增强型LB预混培养基仍需添加IPTG进行目标蛋白的诱导表达。
☆ 应用案例
1. 大肠杆菌DH5α培养对比结果
以1: 1000比例转种过夜活化菌至新鲜培养基,37°C,180rpm培养:
2. 大肠杆菌BL21(DE3)培养对比结果
以含有质粒pET21a-O的BL21(DE3)为测试菌种(该菌种表达蛋白O)。以1: 1000比例转种过夜活化菌至新鲜培养基(含相应抗生素),37°C,180rpm培养:
3. 大肠杆菌BL21(DE3)/pET21a-O诱导表达培养对比结果
以含有质粒pET21a-O的BL21(DE3)为测试菌种(该菌种表达蛋白O)。以1: 1000比例转种过夜活化菌至新鲜培养基(含相应抗生素),37°C,180rpm培养,至OD600=1时,加入IPTG(终浓度1mM)诱导表达外源蛋白,继续37°C培养:
结论:在本次培养基和诱导表达条件下,O蛋白在赛多培®增强型LB预混培养基中的表达总量明显高于传统LB培养基。
产品目录
货号 |
产品名称 |
规格 |
目录价格 |
PR0301 |
赛多培®增强型LB预混培养基 |
500 mL |
85 |
PR0302 |
10L |
640 |
|
PR0303 |
10×10L |
2760 |
三、大肠杆菌专用破菌液
☆ 产品优势
1. 节省成本
只需将菌体与破菌液简单混匀,然后冻融即可,不需要超声仪就能使菌体破碎,释放可溶上清。节省仪器成本和人力成本。
2. 组成成分温和
不含还原剂、强变性剂、离子型去污剂等烈性成分,对绝大多数蛋白结构和活性无影响。
3. 可用于高通量筛选工程菌
原位破菌,筛选成本更低,适用于各种型号培养板(如96孔板、48孔板、6孔板等)。
4. 使用搭配灵活
可搭配尊龙凯时超级核酸酶(货号:CR1001),降解菌体裂解后的核酸,以降低破菌液粘度,以利于后续操作;也可以根据需要添加蛋白酶抑制剂、还原剂、NaCl等成分。
☆ 数据对比
注: 1:大肠杆菌专用破菌液破菌上清 2:大肠杆菌专用破菌液破菌沉淀
3:超声破菌破菌上清 4:超声破菌破菌沉淀
M:蛋白Marker
产品目录
货号 |
产品名称 |
规格 |
目录价格 |
PR0202 |
大肠杆菌专用破菌液 |
500mL |
126 |
四、大肠杆菌菌株
产品目录
货号 |
产品名称 |
规格 |
目录价格 |
PB0101 |
DH5α甘油菌 |
0.5 mL |
550 |
PB0201 |
Top10甘油菌 |
0.5 mL |
550 |
PB0111 |
BL21(DE3) 甘油菌 |
0.5 mL |
550 |
注:1. 活动日期:截止到2025年3月31日;
2. 终端与经销活动一致;
3. 本活动最终解释权归尊龙凯时(北京)生命科学技术有限公司所有。
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